高通量DSF分析儀，高通量DSF(差示掃描熒光)分析儀是一種先進的儀器，廣泛應用于生物藥物研究、蛋白質穩定性分析等領域。以下是對其的詳細介紹：
一、基本原理
DSF(Differential Scanning Fluorimetry)是通過在熒光定量PCR儀上緩慢加熱樣品，在加熱的過程中檢測熒光染料與結構發生改變的蛋白質相結合的量，來評價蛋白質熱穩定性的方法。它可以通過熒光染料或蛋白內源熒光信號監測升溫過程中蛋白構象的變化，計算其熔解溫度Tm(折疊蛋白與去折疊蛋白相等時的溫度)。
二、主要特點
高通量：高通量DSF分析儀能夠在極短的時間內獲取盡可能多的信息。例如，SUPR-DSF型號的分析儀可以在60至80分鐘內完成384個樣品的穩定性分析與篩選。
低成本：使用標準的384孔板，無需特殊耗材以及毛細管，一次成本僅100元左右。
寬溫度掃描范圍：具有10℃~105℃的寬溫度掃描范圍，能夠覆蓋多個蛋白質的結構域。
高靈敏度：采用高靈敏度的CMOS檢測器，能夠準確檢測熒光變化。
樣品用量少：樣品用量僅需1020μL，濃度范圍0.05mg/ml250mg/ml，適用于多個階段的穩定性分析。
三、儀器構成
高通量DSF分析儀主要由以下幾個部分組成：
讀板機：用于裝載384孔板，讀取樣品信息。
激發光源：通常采用LED激發波長，如280nm，輸出功率為10mW。
檢測系統：包括光譜儀和檢測系統，用于檢測熒光信號。光譜儀的波長范圍通常為310nm~420nm。
數據處理軟件：用于繪制熒光強度隨溫度的變化曲線，通過擬合波爾茲曼方程計算出蛋白樣品的Tm值及相關參數。
四、操作流程
高通量DSF分析儀的操作流程通常包括以下幾個步驟：
樣品準備：將蛋白樣品和熒光染料混合后，加入到384孔板中。
設置參數：設置儀器的升溫速率、溫度范圍等參數。
開始檢測：將384孔板放入儀器中，開始檢測熒光信號。
數據分析：使用數據處理軟件對檢測數據進行處理和分析，得出蛋白樣品的Tm值及相關參數。
五、應用領域
高通量DSF分析儀在多個領域都有廣泛的應用，包括但不限于：
蛋白質穩定性分析：評估蛋白質在不同條件下的穩定性，如溫度、pH值、離子強度等。
藥物篩選：通過高通量篩選技術，快速篩選出與靶蛋白結合的候選藥物。
蛋白質結構研究：研究蛋白質的結構和構象變化，為蛋白質結晶等研究提供有力支持。
小分子化合物抑制機制研究：用于小分子化合物抑制劑的篩選及其藥理機制的研究。
六、儀器維護與保養
為了確保高通量DSF分析儀的正常運行和延長使用壽命，需要進行定期的維護和保養。這包括清潔儀器表面、檢查光源和檢測系統的工作狀態、校準儀器等。此外，還需要注意樣品的處理和存儲條件，避免樣品污染和變質對實驗結果的影響。
綜上所述，高通量DSF分析儀是一種功能強大、操作簡便的儀器，在生物藥物研究和蛋白質穩定性分析等領域具有廣泛的應用前景。
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