圓二色光譜儀是一種分析化學(xué)中常用的儀器,主要用于測量物質(zhì)在不同波長下對于左旋圓偏振光和右旋圓偏振光的吸收情況,從而得到有關(guān)于樣品結(jié)構(gòu)、構(gòu)象等信息。廣泛應(yīng)用于化學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)藥等領(lǐng)域。
圓二色光譜儀利用了圓二色現(xiàn)象,即分子或離子具有左旋性或右旋性時,在經(jīng)過旋光片(一個將線偏振光轉(zhuǎn)化為圓偏振光的裝置)后就會對不同方向的圓偏振光產(chǎn)生不同的吸收,這種差異可以通過測量樣品在左旋圓偏振光和右旋圓偏振光下的吸收差異來進(jìn)行分析。
圓二色光譜儀通常采用兩個光源,一個是普通的白光源,另一個是偏振光源(通常是汞燈)。經(jīng)過旋光片后,兩個光源都會變成圓偏振光。這兩個光源的圓偏振光再經(jīng)過單色器或者光柵分光鏡,被分為不同波長的光,并通過樣品,最后被檢測器檢測到。在測量過程中,圓二色光譜儀可以同時檢測左旋圓偏振光和右旋圓偏振光的吸收情況,并計算它們之間的差異,從而得到有關(guān)于樣品結(jié)構(gòu)、構(gòu)象等信息。
圓二色光譜儀主要由以下幾個部分組成:
光源:通常使用兩個光源,一個是白光源,另一個是汞燈。這兩個光源需要通過旋光片轉(zhuǎn)化為圓偏振光,在經(jīng)過單色器或者光柵分光鏡分離出不同波長的光線。
旋光片:用于將線偏振光轉(zhuǎn)化為圓偏振光。通常采用四分之一波片或半波片。
樣品池:用于放置樣品的儀器部件。通常使用四面透明的石英玻璃制作而成,以避免對于樣品的影響。
檢測器:可以檢測樣品在不同波長下對于左旋圓偏振光和右旋圓偏振光的吸收情況,并計算它們之間的差異。
計算機(jī):用于控制儀器的測量參數(shù),收集和分析數(shù)據(jù)。通過計算機(jī)還可以進(jìn)行數(shù)據(jù)處理、繪圖等操作。
圓二色光譜儀的優(yōu)勢包括:
1.可用于蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子的結(jié)構(gòu)研究和定量分析。
2.測量簡便,操作方便,不需要標(biāo)記樣品。
3.可同時測量多個樣品或反應(yīng)體系的動態(tài)變化。
4.適用于生物體系中不同結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)和核酸。
5.具有高選擇性和靈敏度,在微小的結(jié)構(gòu)改變時也能檢測到。